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    《木豆内生真菌分离、鉴定及其应用》以木豆内生真菌为研究对象，对木豆内生真菌分离、鉴定及其应用的研究成果进行了汇编总结。《木豆内生真菌分离、鉴定及其应用》共分6章，主要介绍了木豆及其内生真菌的研究概况；木豆内生真菌的分离、纯化及鉴定；特异性木豆内生真菌发酵生产木豆功能活性成分；特异性木豆内生真菌发酵生产黄柄曲霉素及其生物防治应用，以及特异性木豆内生真菌发酵生产漆酶及其染料脱色应用。内容汇集了著者长期积累的教学与科研经验，旨在为从事植物内生真菌研究的工作者提供较系统的理论知识和较全面的实用技术。

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    章绪论1

1.1植物内生真菌简介1

1.1.1植物内生真菌的定义1

1.1.2植物内生真菌的特性1

1.1.3植物内生真菌的生物学作用3

1.2木豆研究概况6

1.2.1木豆简介6

1.2.2木豆的主要化学成分8

1.2.3木豆的主要药理活性8

1.3植物内生真菌产物的生物活性研究11

1.3.1植物内生真菌的抗氧化活性研究12

1.3.2植物内生真菌的抗菌活性研究13

1.3.3植物内生真菌的抗肿瘤活性研究14

1.3.4植物内生真菌的生物防治病虫害研究15

1.3.5植物内生真菌的漆酶染料脱色研究16

1.3.6植物内生真菌的其他生物活性研究19

参考文献20

第2章木豆内生真菌的分离、纯化及鉴定29

2.1木豆内生真菌的分离与纯化29

2.1.1样品表面消毒及消毒效果检查29

2.1.2内生真菌的分离与纯化30

2.2木豆内生真菌的鉴定30

2.2.1形态学鉴定30

2.2.2分子生物学鉴定31

2.3结果与讨论34

2.3.1木豆内生真菌的分离及鉴定34

参考文献37

第3章特异性木豆内生真菌发酵生产木豆功能活性成分38

3.1特异性产木豆活性成分内生真菌的筛选及鉴定过程38

3.1.1特异性产cajanol木豆内生真菌的筛选38

3.1.2特异性产CSA木豆内生真菌的筛选39

3.1.3特异性产木豆活性成分内生真菌的鉴定39

3.2特异性产木豆活性成分内生真菌的发酵工艺优化设计40

3.2.1种子培养40

3.2.2发酵培养40

3.2.3活性成分的提取方法40

3.2.4活性成分的定量方法40

3.2.5内生真菌的发酵条件单因素优化41

3.2.6中心组合设计与响应面优化活性成分的产量41

3.3特异性产木豆活性成分内生真菌发酵产物的分离纯化设计42

3.3.1内生真菌的发酵培养及CSA粗提物的制备42

3.3.2中压正相柱层析分离纯化木豆芪酸42

3.3.3中压反相柱层析分离纯化木豆芪酸43

3.3.4结构鉴定43

3.4特异性产木豆活性成分内生真菌发酵产物的活性评估44

3.4.1特异性产cajanol内生真菌发酵产物的活性评估44

3.4.2特异性产CSA内生真菌发酵产物的活性评估45

3.5结果与讨论49

3.5.1特异性产木豆活性成分内生真菌的筛选及鉴定49

3.5.2特异性产木豆活性成分内生真菌的发酵工艺优化61

3.5.3特异性产CSA内生真菌发酵产物的分离纯化69

3.5.4特异性产木豆活性成分内生真菌发酵产物的活性评估72

参考文献78

第4章特异性木豆内生真菌发酵生产黄柄曲霉素及其生物防治应用81

4.1特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的筛选及鉴定过程81

4.1.1抗菌活性菌株的初筛81

4.1.2木豆内生真菌液体培养及发酵物的提取81

4.1.3抗菌活性菌株的复筛81

4.1.4LC-MS/MS检测特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌82

4.1.5特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的鉴定82

4.2特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的发酵工艺优化设计82

4.2.1发酵培养82

4.2.2发酵条件单因素优化83

4.2.3中心组合设计与响应面优化发酵液中黄柄曲霉素的含量83

4.2.4统计学处理84

4.3特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌发酵产物的分离纯化设计84

4.3.1内生真菌的发酵培养及黄柄曲霉素粗提物的制备84

4.3.2中压正相柱层析分离纯化黄柄曲霉素85

4.3.3结构鉴定86

4.4特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的生物防治的应用86

4.4.1黄柄曲霉素对病原真菌菌丝生长的影响86

4.4.2黄柄曲霉素对病原真菌孢子萌发的影响87

4.4.3黄柄曲霉素对病原真菌细胞膜通透性的影响87

4.4.4黄柄曲霉素对病原真菌菌丝脂质过氧化的影响87

4.4.5黄柄曲霉素对大豆根腐病的盆栽防治效果测定88

4.4.6统计学处理88

4.5结果与讨论89

4.5.1特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的筛选及鉴定89

4.5.2特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的发酵工艺优化95

4.5.3特异性产黄柄曲霉素内生真菌发酵产物的分离纯化100

4.5.4特异性产黄柄曲霉素木豆内生真菌的生物防治应用102

参考文献106

第5章特异性木豆内生真菌发酵生产漆酶及其染料脱色应用107

5.1特异性产漆酶木豆内生真菌的筛选及鉴定过程107

5.1.1特异性产漆酶木豆内生真菌的筛选107

5.1.2漆酶酶活测定108

5.1.3特异性产漆酶木豆内生真菌的鉴定108

5.1.4统计学处理108

5.2特异性产漆酶木豆内生真菌的发酵工艺优化设计108

5.2.1主要培养基及有关试剂的配制108

5.2.2内生真菌R-37培养109

5.2.3漆酶酶活测定109

5.2.4菌体生物量测定109

5.2.5内生真菌R-37发酵条件单因素优化110

5.2.6中心组合设计与响应面优化漆酶的产量110

5.2.7统计学处理111

5.3特异性产漆酶木豆内生真菌的染料脱色的应用111

5.3.1试剂配制111

5.3.2漆酶酶活测定111

5.3.3最适反应温度及热稳定性111

5.3.4最适反应pH及pH稳定性111

5.3.5染料脱色体系的建立112

5.3.6染料脱色率的测定112

5.3.7统计学处理113

5.4结果与讨论113

5.4.1特异性产漆酶木豆内生真菌的筛选及鉴定113

5.4.2特异性产漆酶木豆内生真菌的发酵工艺优化116

5.4.3特异性产漆酶木豆内生真菌的染料脱色应用123

参考文献130

第6章展望131